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影片设定在1998年,影片不再是只把焦点集中在爱丽丝这个角色身上,吉尔将在由安布雷拉(Umbrella)制造的僵尸潮的爆发中扮演重要角色。里昂·肯尼迪(Leon Kennedy)也将入主,在《生化危机4》电影中就有大量来自游戏第五代的boss,所以这次再把游戏第四代的第一男主角里昂带入电影版《生化5》也算情理之中。
主要讲述保护伞公司研发的T病毒持续侵袭地球,仅存的人类被逼到面临人吃人的绝境。人类唯一的希望全在生化人爱丽丝身上,当她从保护伞公司的秘密实验室里苏醒后,跑遍东京、纽约、华盛顿和莫斯科四地,试图追出散播病毒的凶手。
没想到,一连串的意外让爱丽丝面临真假难辨的困境,在昔日伙伴和新盟友艾达的加入下,艾莉丝该如何在天谴大限来临前找出生路,带领人类度过末日危机?